La microflora parietale dell'intestino colonizza la membrana mucosa sotto forma di microcolonie, formando un particolare film biologico costituito da corpi microbici e una matrice esopolio-saccaride. Gli esopolisaccaridi di microrganismi, chiamati glicocalice, proteggono le cellule microbiche da una varietà di effetti fisico-chimici e biologici. La mucosa intestinale è anche protetta da un film biologico.
La funzione più importante della normale microflora intestinale è la sua partecipazione alla resistenza alla colonizzazione, intesa come una combinazione di fattori protettivi del corpo e di caratteristiche competitive, antagoniste e di altri anaerobi intestinali, che conferisce stabilità alla microflora e microrganismi estranei che impediscono la colonizzazione delle mucose.
La normale microflora vaginale comprende batteri, lattobacilli, peptostreptokokki e clostridi.
Rappresentanti della microflora normale, riducendo la resistenza del corpo, possono causare processi infiammatori purulenti, vale a dire la normale microflora può essere una fonte di autoinfezione o infezione endogena. È anche una fonte di geni, come i geni di resistenza ai farmaci antibiotici.
La microflora parietale è
Una varietà di malattie infiammatorie intestinali non infettive e disturbi "funzionali" (sindrome dell'intestino irritabile) sono spesso accompagnate da cambiamenti nell'omeostasi microecologica. Allo stadio attuale di sviluppo della gastroenterologia domestica, il problema della disbiocenosi intestinale viene valutato da nuove prospettive (Sheptulin AA, 1999).
Numerosi articoli di discussione sono dedicati a questo problema sul ruolo della microflora intestinale nell'assicurare il normale funzionamento del corpo, nonché sugli aspetti microbiologici dei disturbi diagnostici della biocenosi (B. Shenderov, 1998, V. Bondarenko, 1998, V. G. Rumyantsev, G.999, Korneva T..K., 1999, Z. Zimmerman, 2000)
La microflora intestinale è funzionalmente divisa in due gruppi principali: parietale e luminale. La microflora illuminata o transitoria fa parte della microflora fecale. I suoi principali rappresentanti sono microrganismi aerobici e facoltativi aerobici, principalmente membri della famiglia delle Enterobacteriaceae.
La composizione della microflora luminale non è costante e varia a seconda della natura della nutrizione, della qualità del cibo, dello stato funzionale dell'intestino, della frequenza delle feci. A questo proposito, l'esame batteriologico della microflora fecale con il metodo standard (raccomandazioni metodiche del Ministero della Salute dell'URSS n. 10-11 / 31 del 04.14.1986 g) è lo studio di quella parte dello spettro batterico che non esiste più o non sarà nel prossimo futuro.
Quest'ultima circostanza è della massima importanza nell'interpretazione dei risultati della semina batteriologica delle feci nelle cosiddette malattie "funzionali" dell'intestino. In particolare, nella sindrome dell'intestino irritabile con diarrea, vi è una costante "lisciviazione" della microflora luminale ed è difficilmente possibile giudicare in modo attendibile circa una parte della sua costanza e, quindi, gli effetti patologici sulla mucosa.
La microflora parietale è rappresentata per il 99% da batteri anaerobici e facoltativamente anaerobici (bifidobatteri e lattobacilli, batteri, streptococchi di acido lattico, ecc.), La flora parietale è "fissa". I rappresentanti della microflora normale sono attaccati ai recettori di superficie delle cellule epiteliali. È più stabile, è un sistema stabile, che è abbastanza difficile da distruggere.
Considerando il fatto che la colonizzazione delle popolazioni saprofite in tutto il colon è diversa anche in condizioni normali (Michelsaar ME, 1990) e la microflora transitoria domina nei contenuti fecali, così come le difficoltà di valutazione batteriologica dello spettro della microflora intestinale parietale, è molto scorretto giudicare i cambiamenti coenosi microbica solo mediante esame batteriologico delle feci.
A questo proposito, è importante valutare con precisione la microflora parietale del colon. Questo può essere fatto sia batteriologicamente, seminando colonobioptani sui terreni nutritivi, sia mediante esame istobatterioscopico con microscopia ottica di preparati colorati con una tecnica speciale.
Il metodo istobacterioscopico è stato ampiamente utilizzato nelle opere di A.V. Zinserling e la sua scuola nello studio delle malattie infettive. La rilevazione di microrganismi può essere effettuata sia in strisci che in sezioni istologiche. Il loro numero, così come la struttura delle cellule dei tessuti possono essere rilevati usando vari metodi di colorazione (Zinserling AV, 1993).
I problemi derivanti da questo metodo di ricerca sono legati a questioni puramente tecniche - il lavaggio dello strato superficiale del muco con microrganismi che si trovano in esso durante la lavorazione del materiale bioptico, in conseguenza del quale la valutazione della microflora diventa impossibile o inutile.
Metodi di fissazione, che consentono di stabilizzare lo strato di parete del muco da biopsia, sono stati sviluppati per la diagnosi di Helicobacter pylori (Morozov IA, 1997, 1999). Viene proposto un metodo per coprire la superficie della biopsia con uno strato di gel di agar al fine di prevenire il lavaggio del muco parietale quando si posiziona il materiale per valutare il grado di contaminazione e la relazione dei batteri con la superficie della mucosa gastrica.
Questa tecnica viene utilizzata per preservare il muco sopraepiteliale nei colonobioptati. La pre-immersione di un pezzo di membrana mucosa in un gel di agar all'1% riscaldato in un forno a microonde, preparato su tampone fosfato sterile pH 7,2-7,4, consente di fissare il muco con microrganismi e di salvarlo con ulteriore posting e colorazione della biopsia. Lo strato di gel di agar, in una certa misura, crea condizioni anaerobiche per i microrganismi durante la consegna del materiale al laboratorio batteriologico.
Per l'inoculazione batteriologica, è stato utilizzato un frammento di mucosa colica biopted omogeneizzato in 0,1 ml di soluzione di cloruro di sodio isotonico. Nella prima fase dello studio, si intendeva valutare solo la composizione della popolazione aerobica di microrganismi. La contabilità è stata effettuata in unità formanti colonie (CFU) su terreni nutrienti solidi in termini di 1 ml di substrato, seguita dall'identificazione biochimica e sierologica di rappresentanti della famiglia delle Enterobacteriaceae e di altri batteri patogeni condizionali.
Conducendo lo studio istobatterioscopico, il numero di microrganismi nel muco parietale della colonobiopsia è stato valutato mediante un metodo semi-quantitativo per analogia con la determinazione del grado di contaminazione di H. pylori nella gastrobiopsia. grado debole di disseminazione - fino a 20 corpi microbici, corpi biochimici medio-20-50, forte - oltre 50 corpi microbici nel campo visivo con un incremento di x900 (immersione in olio).
Colonobioptata di pazienti con una diagnosi di sindrome dell'intestino irritabile, in cui sono state eseguite la colonscopia e la biopsia per escludere un processo tumorale, una malattia infiammatoria intestinale, ecc., Sono stati scelti come modello per lo studio della microflora parietale del colon.Questi pazienti non presentano marcati cambiamenti strutturali nella colonscopia e nella biopsia. Questi oggetti possono essere considerati come una norma condizionale (membrana mucosa invariata).
Sono stati esaminati 70 pazienti di età compresa tra 15 e 50 anni. Sono stati studiati 210 colonobioptati ottenuti mediante fibrocolonoscopia dal cieco, dal colon trasverso e dal colon sigmoideo. In 30 campioni di biopsia, lo strato di muco parietale sembrava desquami. Allo stesso tempo, il quadro istobacterioscopico non è stato verificato. In 180 preparazioni, è stato preservato lo strato parietale del muco, che ha permesso di sottoporli all'esame istobacterioscopico.
In campioni bioptici della mucosa del cieco (51 campioni) nello studio del metodo istobacterioscopico, è stato rilevato un alto grado di contaminazione in 28 casi. Flora era rappresentata da barre sottili gram-positive, disposte in catene corte o parallele (presumibilmente lattobacilli) e in aspetto pleomorfo (presumibilmente bifidobatteri).
Bastoncini pleomorfi Gram negativi (presumibilmente batteroidi) sono stati osservati in proporzioni quasi uguali con rappresentanti gram-positivi di microrganismi. I piccoli cocchi Gram-positivi situati singolarmente sono stati rilevati in una piccola quantità. Insieme a loro, c'era un debole grado di disseminazione con piccoli bastoncini Gram-negativi, situati separatamente o in coppia (presumibilmente, microrganismi della famiglia delle enterobatteri).
In 20 campioni, le verghe gram-positive e gram-negative sopra descritte, morfologicamente simili a lacto- e bifidobatteri e batteriidi, sono state determinate in quantità moderate, e le barre gram-negative, morfologicamente simili agli enterobatteri, sono state osservate anche in una piccola quantità. Solo in 4 casi, i bacilli gram-negativi della famiglia degli enterobatteri hanno causato un alto grado di inseminazione con un debole grado di colonizzazione della membrana mucosa da parte di rappresentanti della normale microflora.
Semina batteriologica del campione bioptico cecale ha mostrato un aumento dei ceppi completi di E. coli. In 9 campioni bioptici, E. coli sono stati seminati con attività enzimatica ridotta e 4 E. coli con capacità emolitica, in 1 caso è stata identificata una disintossicazione della coltura di Klebsiella.
Lo studio istobatterioscopico di campioni bioptici della mucosa del colon trasverso ha permesso di stabilire un alto grado di disseminazione per mezzo di barre gram-positive e gram-negative (rappresentanti di microflora normale) in 16 casi. Allo stesso tempo, i rappresentanti della famiglia degli enterobatteri hanno causato un debole grado di colonizzazione.
Nella maggior parte dei casi (42 colonobioptati), i batteri morfologicamente simili ai microrganismi della microflora normale sono stati osservati in quantità moderate e rappresentanti di enterobatteri e cocchi di piccole dimensioni gram-positivi in piccole catene (enterococchi) erano presenti in proporzioni uguali.
A 6 kolonobioptatah rilevare l'elevato grado di contaminazione da Gram piccole, barre diritte negative con una piccola quantità di cocchi gram-positivi disposti come una catena (enterococchi) e cluster (stafilococchi). I saprofiti in questi campioni bioptici erano presenti solo in piccole quantità.
Batteriologicamente, i rappresentanti della normale Escherichia coli sono stati seminati prevalentemente. Insieme a loro, in 10 casi identificato E. coli con proprietà enzimatiche ridotte, così come ceppi emolitici. In 7 casi, sono stati seminati rappresentanti di microflora condizionatamente patogena (Klebsiella, citrobacter, Staphylococcus aureus).
Nella parete di campioni muco biopsia rapporto microrganismi sigmoide era la seguente: da 65 biopsie dell'alto grado di contaminazione della microflora normale con un basso grado di colonizzazione da parte di microrganismi della famiglia delle Enterobacteriaceae è stata osservata in 15 casi, moderato grado di contaminazione dei bastoncini Gram-positivi con una piccola quantità di batteri Gram-negativi e Gram-positivi cocchi 32 biopsie In 18 campioni, i membri della famiglia delle enterobatteri hanno prevalso su microrganismi anaerobici.
Il loro numero era stimato come alto e basso grado di diffusione, rispettivamente. Insieme a questo, in 13 campioni bioptici ci sono stati un gran numero di stafilococchi gram-positivi e in 2 casi sono state osservate cellule fungine in lievito in erba. Nelle colture batteriologiche in proporzioni uguali, erano presenti bastoncini di deformazione con ridotta attività enzimatica, ceppi emolitici e rappresentanti della normale Escherichia coli. La microflora condizionatamente patogena è stata seminata in 13 casi.
In un esame batteriologico parallelo delle feci luminale microflora da una tecnica standard a 43 persone microbiocenosis stato disbiosi intestinale è stato considerato come 2-4 gradi. Tuttavia, quando le violazioni sono state identificate unico studio gistobakterioskopicheskom in 18 pazienti composizione parietale microflora, che consiste nella riduzione del numero di rappresentanti della microflora normale e sedimentazione strato di muco parete vantaggiosamente condizionatamente batteri patogeni.
Uno studio batteriologico del colonobioptato non ha gli stessi aspetti negativi dello studio delle feci, sebbene in misura minore. Le principali difficoltà metodologiche includono la mancanza di metodi selettivi per l'isolamento e la coltivazione anaerobica di batteri anaerobici non scalabili. Ad esempio, nel colon il numero di incolti, batteri anaerobici è di 10 a 10 gradi - 10 gradi a 11 contenuti bw per 1 g (Shenderov BA, 1998).
Il secondo punto negativo è la mancanza di raccomandazioni sviluppate per la valutazione quantitativa dei microrganismi cresciuti, le norme non sono calcolate. Tuttavia, nonostante queste difficoltà batteriologica semina kolonobioptata con strato di muco nativo, vale a dire la parete colonizzato, saprofita microflora sembra essere più rappresentativi dello studio in termini di valutazione del colon microbiocenosis stato che semina con le feci stima microflora transitoria.
La microflora intestinale si è sviluppata nel processo di evoluzione umana, è il risultato di diversi adattamenti, adattamento del microrganismo all'habitat nel macroorganismo (VN Krasnogolovets, 1989).
Il principale processo di energia per il gruppo anaerobico di microrganismi della flora del vicino muro è il meccanismo evolutivamente più antico - la fermentazione che avviene senza ossigeno. La materia organica è il donatore e l'accettatore di elettroni. L'ossigeno per questi batteri è tossico o indifferente. La struttura della mucosa intestinale con i suoi villi, cripte, uno strato di muco prodotto da cellule caliciformi, è un luogo ideale per creare condizioni di anaerobiosi
La normale microflora, colonizzando la mucosa intestinale, è evolutivamente più antica e occupa la sua nicchia. Una delle principali funzioni della parete microflora - fornire resistenza colonizzazione causa di espressione di una varietà di microrganismi antagonisti attivo, antibiotikopodobnyh sostanze, acidi organici, perikisi idrogeno, lisozima, colicins, bloccanti del recettore, ecc per prevenire l'adesione enterociti di microorganismi patogeni e condizionale patogeni..
Anche noto è un'altra funzione importante di microflora saprofita - immunomodulante associata con i batteri Gram-positivi produrre dipeptide muramil, che ha un effetto stimolante sulla fagociti, e con l'influenza della O-antigene di batteri gram-negativi sulla sintesi di cellule immunitarie secernono immunoglobuline, citochine e interferone (A. Bondarenko con et al., 1998).
muco intestinale parietali immunoglobuline secretorie e la flora saprofita costituiscono insieme protezione preepitelialnuyu occupare i recessi e le altezze, formate da enterociti. Accidentalmente intrappolati nelle patogeni intestinali dimora in esso o batteri opportunisti produrre una varietà di endo ed esotossine.
Il percorso verso le tossine verso i loro specifici recettori blocca la barriera mucosa del biofilm. In condizioni favorevoli per la riproduzione massiva di agenti patogeni, esiste una reale possibilità per loro di manifestare le loro proprietà patogene a causa dell'adesione alle cellule epiteliali con successiva colonizzazione della membrana mucosa.
La principale fonte di energia per i microrganismi aerobici della flora luminale è la fosforilazione ossidativa. Il donatore di elettroni è composto organico di origine biologica, che si trova nella quantità ottimale nel lume dell'intestino.
fattori ambientali avversi, disturbi alimentari, uso irrazionale di antibiotici, terapia ormonale e altre influenze negative che indeboliscono la resistenza aspecifica e specifica dell'ospite, contribuiscono alla formazione nella infiammazione cronica tratto gastrointestinale e disbiosi concomitante.
Con la possibilità di contatto con enterociti (colonociti) in luoghi "svolta" di patogeni innesca secrezione di tipo 3 (kontaktzavisimaya) - il meccanismo molecolare di base di sopravvivenza e moltiplicazione nell'organismo ospite che è comune a vari batteri (Musser J M, 1996). Questo meccanismo è responsabile per il trasporto di molecole effettrici dal citoplasma alla superficie batterica dove sono in contatto causando modificazione delle proteine cellulari. Tali molecole effettrici furono trovate in Yersinia, S flexneri, E coli (Ryapis LA, Lipnitsky AV, 1998).
Se lo strato danni di muco che contengono IgA, degranulazione delle cellule caliciformi si verifica con la distruzione della flora saprofita (Droy M.T 1985). Questo è il modo in cui il biofilm proveniente dalla normale microflora viene sostituito da un biofilm di microrganismi condizionatamente patogeni o patogeni. In determinate condizioni, batteri opportunisti potrebbero diventare più competitivo rispetto ai siti di adesione di bifidobatteri e lattobacilli, nonché la loro connessione con le cellule estremamente forti, diventa possibile formare focolare di infezione endogena.
Pertanto, il metodo di ricerca uso gistobakterioskopicheskogo, insieme morfologico kolvnobioptata valutazione, ci permette di valutare la composizione della microflora del muro, che riflette un quadro oggettivo dello stato di microbiocenosis, come in questo settore viene a contatto con un kolonotsytom microorganismo. Questo metodo, insieme con batteriologica biopsia semina può essere usato per approssimare le caratteristiche della composizione qualitativa della microflora della parete del colon quando la valutazione integrata laboratorio clinico di pazienti con disfunzione intestinale.
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Microflora d'aria
L'aria come habitat è meno favorevole del suolo e dell'acqua - pochi nutrienti, luce solare, essiccazione. La principale fonte di inquinamento atmosferico da parte di microrganismi è il suolo, meno l'acqua. Le specie prevalgono cocchi (inclusi sarcina), batteri delle spore, funghi, actinomiceti. Di particolare importanza è la microflora di spazi chiusi (si accumula quando rilasciata attraverso le vie respiratorie di una persona). Molte infezioni respiratorie (influenza, pertosse, difterite, morbillo, tubercolosi, ecc.) Si diffondono attraverso goccioline trasportate dall'aria (a causa della formazione di aerosol persistenti).
La purezza microbiologica dell'aria è di grande importanza in ambito ospedaliero (operazioni speciali e altri reparti chirurgici).
Microflora umana e il suo valore
Il bambino si sviluppa nel corpo della madre in condizioni normali in condizioni sterili. La formazione di un nuovo sistema ecologico "l'organismo umano + la microflora che lo abita" inizia al momento della nascita, e la sua base è la microflora della madre e l'ambiente che circonda il bambino (prima di tutto, l'aria). In breve tempo, la pelle e le membrane mucose, comunicando con l'ambiente esterno, sono popolate da vari microrganismi. Nella formazione della microflora dei neonati del primo anno (principalmente bifidobatteri e lattobacilli) l'alimentazione naturale (seno) svolge un ruolo essenziale.
La microflora normale (cioè in un corpo sano) è rappresentata quantitativamente e qualitativamente in diverse parti del corpo (ecotopi) in modo diverso. Le ragioni sono condizioni di habitat ineguali.
La microflora autoctona (cioè inerente a questa area) può essere divisa in residente (permanente) e transitoria (non permanente). Sulle mucose, in particolare sul tratto gastrointestinale, i rappresentanti della normale microflora vivono sotto forma di due forme - alcune sono localizzate nel lume (luminale), l'altra è racchiusa in una matrice parietale mucosa che forma un biofilm (microflora parietale) ed è associata alla resistenza di colonizzazione dell'intestino - barriera naturale per proteggere l'intestino (e il corpo nel suo complesso) dagli agenti infettivi.
Microflora della pelle normale
I più popolati da microrganismi sono luoghi protetti dalla luce e dall'asciugatura. La composizione della microflora è più costante nell'area degli orifizi dei follicoli del pelo. Lo stafilococco epidermidis e il S.saprophyticus, i funghi del genere Candida e più raramente i ditteri e i micrococchi sono più spesso rilevati.
Microflora delle vie respiratorie
Le mucose della laringe, della trachea, dei bronchi e degli alveoli di una persona sana non contengono microrganismi. La maggior parte della microflora dei conti di roto e nasofaringe per lo streptococco verde, meno frequentemente neisseries, difteroidi e stafilococchi sono rilevati.
Microflora del tratto genitourinario
La biocenosi microbica è scarsa, le sezioni superiori sono generalmente sterili. I bastoncini lattici di Doderlein (lactobacilli) predominano nella vagina di una donna sana, creando un pH acido che inibisce la crescita di batteri gram-negativi e stafilococchi e dipteroidi. C'è un equilibrio tra lattobacilli su un lato e gardnerella e anaerobi sull'altro.
Microflora del tratto gastrointestinale
I batteri più attivi si insediano nel tratto gastrointestinale. Allo stesso tempo, la colonizzazione viene effettuata chiaramente "per piano". Nello stomaco con una reazione acida dell'ambiente e delle parti superiori dell'intestino tenue, il numero di microrganismi non supera 1000 per ml, più spesso si riscontrano lattobacilli, enterococchi, lieviti, bifidobatteri, E.coli.
La microflora dell'intestino crasso è la più stabile e diversificata. Questo è veramente un serbatoio di batteri dell'intero organismo: più di 250 specie sono state trovate, la biomassa totale di microbi può raggiungere 1,5 kg. Il gruppo dominante nella norma sono innegabili batteri anaerobici (bifidobatteri e batteri) - fino al 99%. Assegni la microflora mucosa (parietale) e luminale. La microflora parietale fornisce la resistenza di colonizzazione dell'intestino, che svolge un ruolo importante nella prevenzione (normale) e nello sviluppo (con patologia) delle malattie infettive esogene ed endogene.
La normale microflora e in particolare la microflora dell'intestino crasso ha un effetto significativo sul corpo. Le sue funzioni principali:
- - protettivo (antagonismo verso gli altri, compresi i microbi patogeni);
- - immunostimolante (antigeni di microrganismi stimolano lo sviluppo del tessuto linfoide);
- - digestivo (principalmente lo scambio di colesterolo e acidi biliari);
- - metabolico (sintesi di B-B1,2,6,12 gruppo di vitamine, K, nicotinico, pantotenico, acido folico).
Esistono vari metodi per studiare il ruolo della normale microflora. Gli gnotobionti (animali senza germi) sono usati per studiare il ruolo dei microrganismi per il funzionamento dei sistemi fisiologici. Le tecnologie gnotobiologiche sono utilizzate per trattare l'immunodeficienza, le ustioni.
A causa di vari effetti che riducono la resistenza naturale, le disbatteriosi si verificano in gravi malattie infettive e somatiche e, in particolare, con l'uso irrazionale di antibiotici. Disbacteriosi: alterazioni della composizione quantitativa e qualitativa della microflora, principalmente dell'intestino. Più spesso accompagnato da un aumento della microflora facoltativa anaerobica o residua (bacilli gram-negativi - Escherichia coli, Proteus, pseudomonadi), stafilococchi, funghi Candida. Questi microrganismi sono generalmente resistenti agli antibiotici e, quando la normale flora viene soppressa dagli antibiotici e una diminuzione della resistenza naturale, sono in grado di moltiplicarsi senza ostacoli.
Le forme più gravi di disbatteriosi sono la polmonite da stafilococco, la colite e la sepsi, la candidosi e la colite pseudomembranosa causate dal Clostridium difficile.
La microflora parietale è
Qual è la normale microflora? Da un punto di vista biologico generale, significa la totalità delle biocenosi - in questo caso, le comunità microbiche che abitano i biotopi (Biotopo ("luogo di vita")) - applicata alla microecologia, questa è una sezione della mucosa, della pelle o dell'organo di un macroorganismo con lo stesso tipo di esistenza per i suoi microrganismi (circa Ed. )) cavità aperte dell'ospite. Il "luogo di vita" ottimale per i microrganismi può servire come cavità orale, rinofaringe, esofago, stomaco, intestino tenue e crasso, uretra, ecc. Tale biotopo, insieme a una biocenosi, forma un ecosistema dei tratti respiratorio, gastrointestinale o urogenitale.
Secondo la capillare definizione di Accademico dell'Accademia Russa delle Scienze Mediche Anatoly Vorobiev (1923-2006), la normale microflora è un rapporto qualitativo e quantitativo di diverse popolazioni microbiche di singoli organi e sistemi, mantenendo l'equilibrio biochimico, metabolico e immunologico del corpo, necessario per mantenere la salute umana.
Dovrebbe essere notato: tutti i microrganismi che vivono in un particolare biotopo, sono in complesse relazioni simbiotiche tra loro, sono collegati da catene trofiche (alimentari). Così, gli ecosistemi delle mucose delle cavità aperte e della pelle si formano dal momento della nascita del bambino e cambiano nel processo della sua crescita e sviluppo. Successione, ad es. il cambiamento consecutivo in una certa area dell'habitat di alcune biocenosi da parte di altri, di norma, termina con la formazione di una comunità microbica stabile e stabile.
MIGLIORAMENTO DELLA MICROECOLOGIA: DISBACTERIOSI
10) regolato da un sistema del loro comportamento collettivo, chiamato QS (Quorum Sensing). Tale "quorum feeling" è stato descritto per la prima volta nello studio del meccanismo di luminescenza dei batteri marini. Come si è scoperto, i segnali normativi trasmessi da una cellula all'altra permettono loro di coordinare le loro azioni, al momento giusto trasformando queste comunità apparentemente elementali in un organismo pluricellulare di milioni di copie. Come l'accademico dell'Accademia Russa delle Scienze Mediche, il direttore del nostro istituto Alexander Gunzburg, spiegato in dettaglio, il tipo QS regola un'ampia gamma di processi fisiologici, tra cui bioluminescenza, formazione di biofilm, sintesi di fattori di patogenicità e antibiotici secreti, trasferimento di plasmi coniugativi e persino replicazione. La formazione di biofilm da parte di Oksana Rybalchenko di batteri condizionatamente patogeni e funghi simili al genere del genere Candida con crescita su un mezzo nutriente denso.
Nella dysbacteriosis intestinale, i batteri transitori di microflora possono entrare nel citoplasma degli enterociti, considerati come una manifestazione di endocitosi - la cattura di piccole particelle, fluidi e macromolecole dalla cellula del macroorganismo. Tra l'altro, tra batteri condizionatamente patogeni (Staphylococcus aureus, E. coli emolitico, Klebsiella, ecc.) E funghi Candida si verificano ceppi, sintetizzando sostanze che distruggono i lattobacilli, scoperti prima dai dipendenti dell'Istituto di Highly Pure Biologics (San Pietroburgo) e dell'Istituto di Epidemiologia e Microbiologia a loro. NF Gamal.
Le manifestazioni cliniche della disbiosi sono caratterizzate da segni che non sono caratteristici della malattia principale. Molto spesso, c'è una diminuzione della resistenza alla colonizzazione, l'inibizione delle funzioni del sistema immunitario con un aumento della suscettibilità alle infezioni. L'ampia diffusione di queste patologie la maggior parte degli autori domestici giustamente considerano uno dei fattori più importanti che determinano l'attuale aumento della frequenza e della gravità delle malattie acute e croniche dell'apparato digerente, respiratorio e urogenitale. (Immagine: Endocitosi di batteri Gram-negativi nella disbiosi intestinale - stadi di cattura di enterobatteri da parte di una cellula eucariotica).
Microflora del corpo umano
La microflora del corpo umano è un insieme evolutivamente stabilito qualitativamente e quantitativamente relativamente costante di microrganismi, tutte le biocenosi e singoli biotopi del corpo.
Il bambino nasce sterile, ma continua a passare attraverso il canale del parto, cattura la microflora di accompagnamento. La formazione della microflora viene effettuata a seguito del contatto del neonato, con i microrganismi ambientali e la microflora del corpo materno. Dall'età di 1-3 mesi la microflora del bambino diventa simile alla microflora di un adulto.
Il numero di microrganismi di un adulto è 10 per 14 individui.
1. Su 1 cm2 della pelle possono essere diverse centinaia di migliaia di batteri
2. Ad ogni respiro, vengono assorbite 1500-14000 o più cellule microbiche.
3. In 1 ml di saliva - fino a 100 milioni di batteri
4. La biomassa totale di microrganismi nell'intestino crasso è di circa 1,5 kg.
Tipi di microflora del corpo
Microflora residente - permanente, indigena, autoctona
Transitorio - non permanente, alloctonico
La resistenza alla colonizzazione è normale microflora, impedisce la colonizzazione dei biotopi del corpo da parte di estranei microrganismi patogeni.
Digestione e disintossicazione di substrati e metaboliti esogeni
Sintesi di vitamine, aminoacidi, proteine
Partecipazione allo scambio di acidi biliari, acido urico, lipidi, carboidrati, steroidi
Il ruolo negativo della microflora
I rappresentanti patogenetici condizionali della microflora normale possono essere una fonte di infezione endogena. Normalmente, questi microrganismi non causano problemi e, con un indebolimento del sistema immunitario, come stafilakok, possono causare un'infezione purulenta. E. coli - nell'intestino, e se si manifesta nella vescica - cistite e se entra nella ferita - infezione purulenta.
Sotto l'influenza della microflora, la secrezione di istamina può aumentare - condizioni allergiche
Normoflora è un deposito e una fonte di plasmidi di resistenza antimicrobica.
I principali biotopi del corpo -
Habitat abitati - in questi biotopi, i batteri vivono, si moltiplicano e svolgono determinate funzioni.
Biotopi sterili: i batteri sono normalmente assenti in questi biotopi, l'isolamento dei batteri da essi ha un valore diagnostico.
Genitali esterni, uretra
Canale uditivo esterno
Biotopi sterili - sangue, liquido cerebrospinale, linfa, liquido peritoneale, liquido pleurico, urina nei reni, ureteri e vescica, liquido sinoviale.
Microflora della pelle: stafilococchi epidermici e saprofiti, funghi simili a lieviti, difteroidi, micrococchi.
La microflora del tratto respiratorio superiore - streptococchi, dipteroidi, Neisseria, Staphylococcus.
Cavità orale - stafilococchi, streptococchi, funghi simili a lieviti, batteri lacto, batteriidi, neisserii, spirochete, ecc.
Esofago - normalmente non contiene microrganismi.
Nello stomaco - ambiente dell'habitat - estremamente sgradevole - lattobacilli, lieviti, singoli stafilococchi e streptococchi
Intestino - la concentrazione di microrganismi, la loro composizione e il loro rapporto variano a seconda della sezione intestinale.
Nelle persone sane nel duodeno, il numero di batteri non è più di 10 o 4-10 a 5 unità formanti colonia (co.) Per ml.
Composizione di specie - lattobacilli, bifidobatteri, batteri, enetrococchi, funghi simili a lieviti, ecc. Con l'assunzione di cibo, il numero di batteri può aumentare in modo significativo, ma in breve tempo, ritorna al suo livello originale.
Nell'intestino tenue superiore, il numero di microrganismi è da 10 a 4 a 10 a 5 unità colonizzatrici per ml, nell'ileo a 10 ° all'8 ° grado.
Meccanismi che impediscono la crescita microbica nell'intestino tenue.
Azione antibatterica della bile
Melma contenente inibitori della crescita microbica
In caso di violazione di questi meccanismi, la semina microbica dell'intestino tenue aumenta, vale a dire eccesso di crescita batterica nell'intestino tenue.
In un intestino crasso in una persona in buona salute, il numero di microrganismi varia da 10 a 11 - 10 a 12 ko all'anno. Le specie anaerobiche di batteri predominano - il 90-95% della composizione totale. Questi sono bifidobatteri, batterioidi, batteri lacto, veylonella, peptostreptokokki, clostridi.
Circa il 5-10% - anaerobi facoltativi - e aerobici - E. coli, enterobatteri negativi al lattosio, enterococchi, stafilococchi, funghi tipo lievito.
Tipi di microflora intestinale
Pristenochnaya - costante nella composizione, svolge la funzione di resistenza di colonizzazione
Illuminismo - meno costante nella composizione, svolge funzioni enzimatiche e immunizzanti.
Bifidobactria sono i rappresentanti più significativi di batteri obbligati (obbligatori) nell'intestino. Questi sono anaerobi, non formano spore, sono bastoncini gram-positivi, le estremità sono biforcate e possono avere gonfiori sferici. La maggior parte dei bifidobatteri si trova nel colon, essendo la sua parete principale e la sua microflora luminale. Il contenuto di bifidobatteri negli adulti è di 10 in 9 - 10 nel 10 ° c. sulla città
I lattobacilli sono un altro rappresentante della microflora obbligatoria del tratto gastrointestinale ed è lactobacillus. Questi sono bastoncini gram positivi, con polimorfismo pronunciato, disposti in catene o uno per uno, non formano una spora. La lattoflora può essere trovata nel latte di uomini e animali. Lactobacillus (lactobacilli). Il contenuto nel colon è 10 nel 6 - 10 nell'8 ° kil. sulla città
Rappresentante obbligato microflora dell'intestino è l'escherichia (Escherichia collie). - E. coli. Il contenuto di bastoncini intestinali è 10 nel 7 - 10 nell'ottavo grado di un co sulla città
Eobioz - microflora - flora normale. L'equilibrio biologico della flora normale è facilmente disturbato da fattori naturali esogeni ed endogeni.
Disbacteriosi: alterazioni della composizione qualitativa e quantitativa della microflora e dei suoi normali habitat.
La dysbacteriosis intestinale è una sindrome clinica e di laboratorio associata a cambiamenti nella composizione qualitativa e / o quantitativa della microflora intestinale, con conseguente formazione di disordini metabolici e immunologici, con possibile sviluppo di disturbi gastrointestinali.
Data di inserimento: 30-01-2016; Visualizzazioni: 463; LAVORO DI SCRITTURA DELL'ORDINE
Microflora del corpo umano (auto microflora)
Microflora del corpo umano (auto microflora)
- è un aggregato relativamente costante, qualitativamente e quantitativamente relativamente evoluto, di microrganismi, tutte le biocenosi e singoli biotopi del corpo.
Il bambino nasce sterile, ma continua a passare attraverso il canale del parto, cattura la microflora di accompagnamento. La formazione della microflora viene effettuata a seguito del contatto del neonato, con i microrganismi ambientali e la microflora del corpo materno. Dall'età di 1-3 mesi la microflora del bambino diventa simile alla microflora di un adulto.
Il numero di microrganismi di un adulto è 10 per 14 individui.
1. Su 1 cm2 della pelle possono essere diverse centinaia di migliaia di batteri
2. Ad ogni respiro, vengono assorbite 1500-14000 o più cellule microbiche.
3. In 1 ml di saliva - fino a 100 milioni di batteri
4. La biomassa totale di microrganismi nell'intestino crasso è di circa 1,5 kg.
Tipi di microflora del corpo
- Microflora residente - permanente, indigena, autoctona
- Transitorio - non permanente, alloctonico
Funzione Microflora
- La resistenza alla colonizzazione è normale microflora, impedisce la colonizzazione dei biotopi del corpo da parte di estranei microrganismi patogeni.
- Digestione e disintossicazione di substrati e metaboliti esogeni
- Immunizzazione del corpo
- Sintesi di vitamine, aminoacidi, proteine
- Partecipazione allo scambio di acidi biliari, acido urico, lipidi, carboidrati, steroidi
- Effetto anticancerogenico
Il ruolo negativo della microflora
- I rappresentanti patogenetici condizionali della microflora normale possono essere una fonte di infezione endogena. Normalmente, questi microrganismi non causano problemi e, con un indebolimento del sistema immunitario, come stafilakok, possono causare un'infezione purulenta. E. coli - nell'intestino, e se si manifesta nella vescica - cistite e se entra nella ferita - infezione purulenta.
- Sotto l'influenza della microflora, la secrezione di istamina può aumentare - condizioni allergiche
- Normoflora è un deposito e una fonte di plasmidi di resistenza antimicrobica.
I principali biotopi del corpo -
- Habitat abitati - in questi biotopi, i batteri vivono, si moltiplicano e svolgono determinate funzioni.
- Biotopi sterili: i batteri sono normalmente assenti in questi biotopi, l'isolamento dei batteri da essi ha un valore diagnostico.
Biotopi abitati -
- pelle
- airways
- GI
- Genitali esterni, uretra
- Canale uditivo esterno
- congiuntiva
Biotopi sterili - sangue, liquido cerebrospinale, linfa, liquido peritoneale, liquido pleurico, urina nei reni, ureteri e vescica, liquido sinoviale.
Microflora della pelle: stafilococchi epidermici e saprofiti, funghi simili a lieviti, difteroidi, micrococchi.
La microflora del tratto respiratorio superiore - streptococchi, dipteroidi, neisserii, stafilococchi.
Cavità orale - stafilococchi, streptococchi, funghi simili a lieviti, batteri lacto, batteriidi, neisserii, spirochete, ecc.
Esofago - normalmente non contiene microrganismi.
Nello stomaco - ambiente dell'habitat - estremamente sgradevole - lattobacilli, lieviti, singoli stafilococchi e streptococchi
Intestino - la concentrazione di microrganismi, la loro composizione e il loro rapporto variano a seconda della sezione intestinale.
Nelle persone sane nel duodeno, il numero di batteri non è più di 10 o 4-10 a 5 unità formanti colonia (co.) Per ml.
Composizione di specie - lattobacilli, bifidobatteri, batteri, enetrococchi, funghi simili a lieviti, ecc. Con l'assunzione di cibo, il numero di batteri può aumentare in modo significativo, ma in breve tempo, ritorna al suo livello originale.
Nell'intestino tenue superiore, il numero di microrganismi è da 10 a 4 a 10 a 5 unità colonizzatrici per ml, nell'ileo a 10 ° all'8 ° grado.
Meccanismi che impediscono la crescita microbica nell'intestino tenue.
- Azione antibatterica della bile
- Perelstaltika intestinale
- Isolamento delle immunoglobuline
- Attività enzimatica
- Melma contenente inibitori della crescita microbica
In caso di violazione di questi meccanismi, la semina microbica dell'intestino tenue aumenta, vale a dire eccesso di crescita batterica nell'intestino tenue.
In un intestino crasso in una persona in buona salute, il numero di microrganismi varia da 10 a 11 - 10 a 12 ko all'anno. Le specie anaerobiche di batteri predominano - il 90-95% della composizione totale. Questi sono bifidobatteri, batterioidi, batteri lacto, veylonella, peptostreptokokki, clostridi.
Circa il 5-10% - anaerobi facoltativi - e aerobici - E. coli, enterobatteri negativi al lattosio, enterococchi, stafilococchi, funghi tipo lievito.
Tipi di microflora intestinale
- Pristenochnaya - costante nella composizione, svolge la funzione di resistenza di colonizzazione
- Illuminismo - meno costante nella composizione, svolge funzioni enzimatiche e immunizzanti.
Bifidobactria sono i rappresentanti più significativi di batteri obbligati (obbligatori) nell'intestino. Questi sono anaerobi, non formano spore, sono bastoncini gram-positivi, le estremità sono biforcate e possono avere gonfiori sferici. La maggior parte dei bifidobatteri si trova nel colon, essendo la sua parete principale e la sua microflora luminale. Il contenuto di bifidobatteri negli adulti è di 10 in 9 - 10 nel 10 ° c. sulla città
I lattobacilli sono un altro rappresentante della microflora obbligatoria del tratto gastrointestinale ed è lactobacillus. Questi sono bastoncini gram positivi, con polimorfismo pronunciato, disposti in catene o uno per uno, non formano una spora. La lattoflora può essere trovata nel latte di uomini e animali. Lactobacillus (lactobacilli). Il contenuto nel colon è 10 nel 6 - 10 nell'8 ° kil. sulla città
Rappresentante obbligato microflora dell'intestino è l'escherichia (Escherichia collie). - E. coli. Il contenuto di bastoncini intestinali è 10 nel 7 - 10 nell'ottavo grado di un co. sulla città
Eobioz - microflora - flora normale. L'equilibrio biologico della flora normale è facilmente disturbato da fattori naturali esogeni ed endogeni.
Disbacteriosi: alterazioni della composizione qualitativa e quantitativa della microflora e dei suoi normali habitat.
La dysbacteriosis intestinale è una sindrome clinica e di laboratorio associata a cambiamenti nella composizione qualitativa e / o quantitativa della microflora intestinale, con conseguente formazione di disordini metabolici e immunologici, con possibile sviluppo di disturbi gastrointestinali.
Fattori che contribuiscono allo sviluppo della disbiosi intestinale
- Malattia del tratto digestivo
- inedia
- Chemioterapia antimicrobica
- stress
- Malattie allergiche e autoimmuni
- Radioterapia
- Esposizione a radiazioni ionizzanti
Le manifestazioni cliniche più tipiche
- Violazione della sedia - diarrea, stitichezza
- Dolore addominale, meteorismo, gonfiore
- Nausea e vomito
- Sintomi comuni: affaticamento, debolezza, cefalea, disturbi del sonno, ipovitaminosi possono verificarsi.
Secondo il grado di compensazione emettere -
- Disbiosi compensata: le manifestazioni cliniche sono assenti, ma quando l'esame batteriologico è una violazione.
- Dysbacteriosis subcompensata - applicazioni grafiche minori e moderate.
- Scompensato - quando le manifestazioni cliniche sono più pronunciate.
Classificazione per specie o gruppo di organismi
- Un eccesso di stafilococchi - dysbacteriosis staphylococcal
- Dysbacteriosis, causato da enterobatteri condizionatamente patogeni, funghi simili a lieviti, associazione di microrganismi condizionatamente patogeni e così via.
Dysbacteriosis - il concetto di sindrome batteriologica, clinica e di laboratorio, non è una malattia. La disbacteriosi ha una causa primaria.
Diagnosi di disturbi della microflora
- Diagnosi clinica e di laboratorio e identificazione delle cause della violazione
- Diagnosi microbiologica con determinazione del tipo e grado dei disturbi qualitativi e quantitativi della composizione della microflora.
- Lo studio dello stato immunitario.
Diagnosi microbiologica Violazione della microflora del corpo.
Fase preliminare - esame microscopico di feci - striscio e dipinto da grammo
Ricerca batteriologica o culturale. Questo metodo è stato usato per molti anni. Una porzione di feci sospesa in una soluzione tampone. Preparare una diluizione da 10 a -1 a 10 gradi. Effettuare la semina su un mezzo nutritivo. Identificare i microrganismi cresciuti per mezzo di proprietà culturali, morfologiche, tintorie, biochimiche e di altro tipo e gli indicatori della microflora, CFU / g feci, sono calcolati.
Sostanze nutritive -
Mercoledì Blaurokka - per l'isolamento dei bifidobatteri
Agar MPC per batteri Lacto
Mercoledì Endo, Ploskireva, Levin - per l'isolamento di E. coli e enterobatteri opportunisti.
Mercoledì Wilson - Blair - anaerobi che formano spore - Clostridium
Mercoledì Saburo - funghi tipo lievito - genere Candida
MPA del sangue - microrganismi emolitici
I principi di correzione dei disturbi della composizione della microflora non sono specifici: regime, dieta, decontaminazione dei biotopi del corpo, da microrganismi patogeni e condizionatamente patogeni.
Probiotici e prebiotici
- correzione dei disturbi immunitari.
Probiotici, eubiotici - sono farmaci che includono microrganismi vivi che hanno un effetto normalizzante sulla composizione e sull'attività biologica della microflora del tubo digerente.
Requisiti per i probiotici.
- Conformità alla normale microflora umana
- Alta vitalità e attività biologica
- Antagonismo contro microflora patogena e condizionatamente patogena
- Resistenza a fattori fisici e chimici
- Resistenza agli antibiotici
- Presenza di ceppi simbiotici nel dispositivo
Classificazione dei probiotici
- Classico monocomponente - bifidumbacterin, colibacterin, lactobacterin
- Polycomponent - bifikol, atsilakt, lineks
- Antagonisti auto eliminanti - baktisubtil, sporobacterin, eubicor, enterol
- Combinato - biforme
- Probiotici contenenti ceppi ricombinanti
- Prebiotici - hilak forte, lattulosio, galatto e fruttooligosaccaridi
- Synbiotics - Acipol, Normoflorin
I prebiotici sono preparati che creano condizioni favorevoli all'esistenza della normale microflora.
I sinbiotici sono farmaci che contengono una combinazione razionale di probiotici e prebiotici.
Preparazioni di batteriofagi - specificità di azione su determinati microrganismi.
Cavità addominale e microbiota parietale nella sindrome dell'intestino irritabile
L'articolo tratta il concetto della normale microflora del tratto gastrointestinale e la sua funzione, e funzioni illustrati dei microhabitat cavità murali, fornisce una definizione della sindrome dell'intestino irritabile (IBS) e le sue forme cliniche. Vengono presentati i risultati dello studio della microflora rettale del retto mediante il metodo della reazione a catena della polimerasi in individui sani e pazienti con IBS. Differenze statisticamente significative identificate. Viene presentata un'analisi comparativa della composizione della microflora della mucosa rettale e delle feci in pazienti con IBS con stitichezza e diarrea.
Microbiocenosis studiare la composizione del tratto gastrointestinale (GIT) ha iniziato più di tre secoli fa, quando nel 1681 il ricercatore olandese Antoni van Leeuwenhoek riportato nel primo le sue osservazioni in relazione ai batteri e altri microrganismi presenti nelle feci umane, e ipotizzato sulla coesistenza di differenti tipi di batteri nel tratto digestivo. Attualmente, vi è un diffuso revival di interesse per la microflora intestinale, il suo impatto sulla salute umana e la malattia. Lo sviluppo di nuove tecnologie genetiche molecolari che consentono l'identificazione di numerosi tipi di batteri che non sono suscettibili di coltivazione, è servito come fattore scatenante per lo studio approfondito del microbiota umano. Sono emersi fatti nuovi che indicano che la biocenosi intestinale è associata a malattie non solo del tratto gastrointestinale, ma anche del sistema cardiovascolare, dell'obesità, delle malattie allergiche e autoimmuni [1].
Per studiare lo stato della microbiocenosi e identificare possibili deviazioni dalla normale composizione della microflora del tratto gastrointestinale sono stati definiti con il concetto di normale microflora. La normale microflora è un rapporto qualitativo e quantitativo in singoli organi e sistemi di varie popolazioni di microbi che mantengono l'equilibrio biochimico, metabolico e immunitario del macroorganismo, che è necessario per mantenere la salute umana [2]. Per fare riferimento al normale microflora degli organismi superiori T. Rosebury nella sua monografia «Microrganismi indigena a uomo», pubblicato nel 1962 a New York, ha suggerito il nome di «microbiota», il più comunemente usato nella letteratura moderna. Descrivendo il microbiota, viene spesso usato il termine "biotopo". Sotto il biotopo è comunemente inteso come una trama della mucosa, della pelle o dell'organo di un macroorganismo con lo stesso tipo di condizioni di esistenza di microrganismi [3]. Dal punto di vista moderno, una normale microflora umana è considerata come un sistema filogeneticamente formato di microbiocenosi multiple caratterizzate da una specifica composizione di specie e che occupa un particolare biotopo nel corpo umano [4]. La massa totale di tutti i microrganismi che colonizzano gli organi e i tessuti umani è di 3-5 kg.
La microflora del tratto gastrointestinale è la più rappresentativa, la sua massa in un adulto è più di 2,5 kg, il numero - 1014 CFU [5]. Con i nuovi dati ottenuti nello studio della microflora del tubo digerente vari habitat utilizzando tecniche genetiche molecolari, i batteri genoma GIT complessivi conteggi di 600 mila. I geni che 24 volte la dimensione del genoma umano. La maggior parte dei nuovi phylotypes proposti di microrganismi sono rappresentanti dei generi Firmicutes e Bacteroides. Il numero totale di specie si avvicina al 1500 e richiede ulteriori chiarimenti [6].
La cavità del tratto gastrointestinale attraverso il sistema dello sfintere comunica con l'ambiente esterno del mondo che ci circonda e allo stesso tempo attraverso la parete intestinale - con l'ambiente interno del corpo. Grazie a questa caratteristica, è stato creato un ambiente intrinseco nel tratto gastrointestinale, che può essere diviso in due nicchie separate: il chimo e la mucosa. In termini micro-ecologici, il biotopo gastrointestinale può essere suddiviso in palangari (cavità orale, stomaco, sezioni intestinali) e microbiotopi (addominali e parietali).
Il microbiotopo della cavità in tutto il tratto gastrointestinale è eterogeneo, le sue proprietà sono determinate dalla composizione e dalla qualità del contenuto di uno o dell'altro livello. I palangari hanno le loro caratteristiche anatomiche e funzionali, quindi il loro contenuto varia nella composizione delle sostanze, nella consistenza, nel pH, nella velocità di movimento e in altre proprietà. Queste proprietà determinano la composizione qualitativa e quantitativa delle cavità microbiche adatte a loro. La microflora addominale è più variabile della mucosa ed è sensibile a varie influenze esogene.
A questo proposito, per la formazione di ottimale parametri quantitativi e qualitativi cavità microflora è molto importante assunzione di fibre non digeribili, che agiscono sia come substrato nutriente o matrice, che sono fissi e formare colonie rappresentanti obbligano microflora.
Il microbiotopo parietale è la struttura più importante, limitando l'ambiente interno del corpo dall'esterno. È rappresentato da strati di mucosa (gel mucoso, gel di mucin), glicocalice situati sopra la membrana apicale degli enterociti (colonociti) e la superficie della membrana apicale stessa. La microflora parietale dell'intestino colonizza la membrana mucosa sotto forma di microcolonie, formando un particolare film biologico costituito da corpi microbici e una matrice di esopolisaccaridi. Gli esopolisaccaridi di microrganismi (glicocalice) proteggono le cellule microbiche da una varietà di effetti fisico-chimici e biologici. La mucosa intestinale è anche protetta da un film biologico. Esiste una stretta relazione tra colonie di microrganismi e parete intestinale, che consente loro di essere combinati in un complesso di tessuto microbico [7]. Il microbiotopo parietale è di grande interesse dal punto di vista della batteriologia, poiché è in esso che si pone l'interazione con i batteri che è benefico o dannoso per l'uomo - ciò che chiamiamo simbiosi. La microflora addominale e parietale sono due popolazioni interconnesse, tra le quali vi è uno scambio costante di microrganismi, a seguito del quale si forma una variante individuale della normale microflora intestinale.
Tra microflora intestinale e eubioticheskoy principali funzioni gastrointestinali sono strettamente legati: la microflora intestinale eubioticheskaya influiscono sulla funzione gastrointestinale, che a loro volta hanno un impatto sulla eubioz. In questa relazione viene mantenuta l'integrità strutturale e funzionale della membrana mucosa; attività motoria, fornendo il movimento del substrato lungo il tratto gastrointestinale; trasformazione di polimeri alimentari mediante lipolisi e idrolisi; trasporto di sostanze nutritive attraverso uno strato di strati mucosi; regolazione del processo digestivo mediante substrato e meccanismi neuroendocrini; protezione del corpo dall'aggressione di antigeni estranei; mantenere eubiosi e mantenere costanti qualitative e quantitative dell'equilibrio della popolazione di microbiocenosi intestinale [8].
Una delle malattie, che, come dimostrato da numerosi studi degli ultimi anni, è accompagnata da cambiamenti nella microbiocenosi del GIT, è la sindrome dell'intestino irritabile (IBS). Secondo il Consenso Romano III sui disturbi digestivi funzionali, l'IBS è una malattia funzionale dell'intestino in cui il dolore addominale o il disagio addominale sono associati a defecazione, cambiamenti nella frequenza e nella natura delle feci. A seconda dei sintomi, l'IBS è diviso in tre forme: con una predominanza di diarrea, con una predominanza di stitichezza e mista, che è caratterizzata dall'alternanza di stitichezza e diarrea [9]. La capacità della microflora intestinale producono neurotrasmettitori influenzano enterinovuyu sistema e quindi modificare la secrezione e la motilità intestinale, così come soglia di sensibilità viscerale, dimostra l'importanza delle variazioni di CPK patogenesi disbiosico [10, 11].
È noto che la composizione della microflora delle feci differisce da quella della mucosa intestinale. Ma qual è la natura di queste differenze e se la forma clinica della malattia è importante, una caratteristica della disfunzione motoria intestinale, è sconosciuta. In considerazione di quanto sopra, ci è sembrato rilevante e interessante studiare la composizione della microflora parietale del retto di individui sani e pazienti con IBS; condurre una valutazione comparativa della composizione della microflora della cavità e del microbiotipo parietale del retto dei pazienti con IBS utilizzando la reazione a catena della polimerasi in tempo reale (PCR-RV).
Materiale e metodi
Per risolvere i problemi, sono stati selezionati 40 pazienti con IBS: 20 pazienti sono stati diagnosticati con IBS con prevalenza di diarrea (IBS-D) e 20 pazienti con IBS con prevalenza di stitichezza (IBS-W). La diagnosi della malattia era basata sui criteri diagnostici sviluppati dal consenso romano III sui disturbi digestivi funzionali. I maschi rappresentavano il 62,5%, l'età media dei pazienti era 39,6 ± 8,0 anni. Il gruppo di controllo (GC) era composto da 14 volontari sani di normale alimentazione dai 19 ai 50 anni (11 uomini e 3 donne). Una condizione obbligatoria per l'inclusione nel gruppo di soggetti è stata scritta consenso scritto da ciascun paziente e soggetto sano. Campioni di campioni bioptici di mucosa del retto sono stati raccolti da individui sani e pazienti selezionati con fibrosigmoscopia, campioni fecali sono stati raccolti da pazienti, che sono stati congelati per successiva analisi molecolare mediante PCR-RV.
La diagnostica PCR dei campioni in esame è stata effettuata utilizzando l'amplificatore DT96 (NPO DNA-Tekhnologiya, Russia), che ha garantito prestazioni PCR con registrazione automatica dei risultati in modalità "tempo reale". Il kit di reagenti includeva una miscela per l'amplificazione PCR, specifica per tutti i batteri (massa batterica totale), miscele specifiche per i microrganismi rilevati. Un campione di controllo interno è stato aggiunto a una delle provette con il mix di amplificazione per valutare l'efficienza della corsa PCR. Uno dei tubi conteneva una miscela per l'amplificazione del DNA genomico umano, progettata per valutare il controllo sull'assunzione di materiale clinico.
Nei campioni studiati mediante il metodo di PCR-RV, sono stati determinati i seguenti indicatori: controllo della cattura del materiale (CME), massa batterica totale (MBP), valori assoluti di microrganismi, con successivo calcolo degli indicatori relativi. I valori assoluti di indicatori MBP, il VCR e microrganismi diagnosticati nei risultati di RT-PCR sono stati espressi come logaritmo (lg), calcolata dal numero di ciclo soglia, e approssimativamente corrispondono al numero del DNA desiderato, espresso come equivalenti genoma nel campione (ET / mod). Per un'analisi più obiettiva, gli indicatori quantitativi relativi calcolati del microbiota riflettono il numero di microrganismi specifici in relazione alla massa batterica totale. Gli indicatori relativi sono stati presentati come la differenza dei logaritmi decimali del corrispondente gruppo di microrganismi e della massa batterica totale.
Nei campioni sono stati identificati 27 gruppi di batteri dei quattro principali filotipi (Firmicutes, Bacteroidetes, Proteobacteria, Actinobacteria) (Tabella 1).
L'elaborazione statistica dei dati è stata eseguita su un personal computer utilizzando programmi per computer con licenza Microsoft Excel 2007 e SPSS-Statistics 17. Quando si analizza la distribuzione dei dati quantitativi, le misure di tendenza centrale - la mediana (Me) - sono determinate e le misure di dispersione - l'intervallo interquartile sotto forma di 25 e 75% di percentili. Il test non parametrico di Mann - Whitney è stato utilizzato per calcolare il significato delle differenze in piccoli campioni. Il criterio della significatività statistica era il livello p ≤ 0,05.
Risultati della ricerca e discussione
Nella prima fase del lavoro è stata condotta un'analisi comparativa della microflora della mucosa rettale di volontari sani e pazienti con IBS-D e IBS-W. Innanzitutto, l'aumento della contaminazione batterica totale della mucosa rettale in entrambe le forme cliniche di IBS è degno di nota. Le differenze in CPK-3 - MBP - 6.0 (5.6; 6.5) lg GE / arr erano statisticamente significative. in confronto con il gruppo di controllo - MBP - 5.2 (4.0, 5.6) log GE / arr. (p = 0,002).
In IBS, indipendentemente dalla forma clinica, un alto contenuto di Faecalibacterium praustnizi è stato trovato nella microflora mucosa del retto rispetto a GC: con IBS-G (p = 0,047), IBS-D (p = 0,05). Nei pazienti con IBS-D rispetto a GK, la concentrazione di Eubacterium spp era inferiore. (p = 0,049) (Fig. 1).
Per stabilire la relazione tra la frequenza massima delle feci al giorno con IBS-D e la concentrazione di eubatteri nella mucosa rettale, è stata eseguita un'analisi di correlazione di questi indicatori. È stato stabilito che il numero massimo di movimenti intestinali al giorno è correlato negativamente con la concentrazione di eubatteri nella mucosa rettale (-0,47; p